Views: 0 Author: Site Editor ເວລາເຜີຍແຜ່: 2026-05-01 ຕົ້ນກໍາເນີດ: ເວັບໄຊ
ແມ່ນແລ້ວ, histidine ແນ່ນອນປະກອບດ້ວຍ an ແຫວນ imidazole ເປັນລະບົບຕ່ອງໂສ້ດ້ານຂ້າງທີ່ມີປະໂຫຍດ. ຄວາມຈິງດ້ານໂຄງສ້າງທີ່ງ່າຍດາຍນີ້ມີນ້ຳໜັກທາງວິທະຍາສາດອັນໃຫຍ່ຫຼວງ. ມັນກໍານົດວິທີການອາຊິດ amino ປະຕິບັດຕົວຢູ່ໃນລະບົບຊີວະພາບແລະຫ້ອງທົດລອງສັງເຄາະຄືກັນ. ຖ້າເຈົ້າຈັດການຫ້ອງທົດລອງ ຫຼືພັດທະນາຢາຊີວະພາບ, ເຈົ້າຮູ້ຄວາມສຳຄັນຂອງໂມເລກຸນ. ຄຸນລັກສະນະທີ່ຊັດເຈນຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂ້າງຄຽງນີ້ມີຜົນກະທົບໂດຍກົງຕໍ່ໂປໂຕຄອນການສັງເຄາະ peptide, ການສ້າງບັບເຟີ, ແລະຜົນໄດ້ຮັບດ້ານວິສະວະກໍາທາດໂປຼຕີນ.
ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບພຶດຕິກໍາທີ່ແຕກຕ່າງກັນນີ້ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານຫຼີກເວັ້ນຄວາມຜິດພາດຂອງການສັງເຄາະຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ. ມັນຍັງອະນຸຍາດໃຫ້ທ່ານເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຫນ້າທີ່ enzymatic ໃນຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ downstream. ໃນບົດຄວາມນີ້, ທ່ານຈະຄົ້ນຫາໂຄງສ້າງພື້ນຖານຂອງ histidine. ພວກເຮົາຈະເປີດເຜີຍວິທີການທີ່ແຫວນ heterocyclic ເປັນເອກະລັກຂອງມັນເຮັດໃຫ້ຫນ້າທີ່ທາງຊີວະເຄມີທີ່ສໍາຄັນ. ນອກຈາກນັ້ນ, ທ່ານຈະໄດ້ຮຽນຮູ້ຍຸດທະສາດການປະຕິບັດສໍາລັບການຄຸ້ມຄອງຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການຈັດຕັ້ງປະຕິບັດໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ peptide ໄລຍະແຂງ. ສຸດທ້າຍ, ພວກເຮົາສະຫນອງກອບການປະຕິບັດສໍາລັບການປະເມີນຢ່າງເຂັ້ມງວດຂອງຕົວອະນຸພັນ histidine ການຄ້າເພື່ອຮັບປະກັນລະບົບຕ່ອງໂສ້ການສະຫນອງ reagent ຂອງທ່ານ.
ຄວາມແນ່ນອນດ້ານໂຄງສ້າງ: ລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂ້າງຂອງ histidine ແມ່ນວົງແຫວນ imidazole, ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນເອກະລັກຂອງອາຊິດຖານແລະຄຸນສົມບັດປະສານງານ.
ຜົນກະທົບດ້ານການທໍາງານ: ດ້ວຍ pKa ໃກ້ກັບ pH ທາງດ້ານຮ່າງກາຍ (~6.0), ກຸ່ມ imidazole ເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນຜູ້ໃຫ້ proton ທີ່ສໍາຄັນ / ຜູ້ຍອມຮັບໃນສະຖານທີ່ທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຂອງ enzymatic.
ຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການຈັດຕັ້ງປະຕິບັດ: ໃນການນໍາໃຊ້ສັງເຄາະ (ຄ້າຍຄືການສັງເຄາະ peptide ໄລຍະແຂງ), ປະລໍາມະນູໄນໂຕຣເຈນທີ່ມີປະຕິກິລິຍາຢູ່ໃນວົງ imidazole ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີຍຸດທະສາດປ້ອງກັນສະເພາະເພື່ອປ້ອງກັນການແຕກແຍກແລະການແຕກງ່າທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ.
ເງື່ອນໄຂການສະຫນອງ: ການປະເມີນທາດປະສົມ histidine ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການກວດສອບຢ່າງເຂັ້ມງວດຂອງຄວາມບໍລິສຸດ enantiomeric ແລະກຸ່ມປ້ອງກັນທີ່ເຫມາະສົມ (ຕົວຢ່າງ, Trt, DNP) ຂຶ້ນກັບກໍລະນີທີ່ໃຊ້ໃນທ້າຍ.
ເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງ histidine, ທ່ານຕ້ອງເຂົ້າໃຈອົງປະກອບໂມເລກຸນຂອງມັນ. ລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂ້າງແມ່ນແຫວນ heterocyclic ຫ້າສະມາຊິກ. ມັນມີສາມປະລໍາມະນູກາກບອນແລະສອງອະຕອມໄນໂຕຣເຈນທີ່ແຕກຕ່າງສູງ. ນັກວິທະຍາສາດຈັດປະເພດໄນໂຕຣເຈນເຫຼົ່ານີ້ໂດຍອີງໃສ່ລັດຜູກມັດຂອງພວກເຂົາ. ຫນຶ່ງປະຕິບັດຕົວຄືກັບ pyrrole ໄນໂຕຣເຈນ, ໃນຂະນະທີ່ອື່ນໆເຮັດຄືກັບ pyridine ໄນໂຕຣເຈນ. duality ໂຄງສ້າງນີ້ເຮັດໃຫ້ histidine versatility ໂດດເດັ່ນ.
ເວທີສົນທະນາທາງວິຊາການມັກຈະໂຕ້ວາທີກ່ຽວກັບຄວາມມີກິ່ນຫອມຂອງໂຄງສ້າງນີ້. ທ່ານອາດຈະເຫັນຕົວແບບປື້ມແບບຮຽນທີ່ຂັດແຍ້ງກັນ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ເອກະສັນກັນທາງເຄມີແມ່ນຈະແຈ້ງ. ແຫວນແມ່ນມີກິ່ນຫອມແທ້ໆ. ມັນພໍໃຈກັບກົດລະບຽບຂອງ Hückel ຢ່າງສົມບູນ. ໂຄງປະກອບການມີລັກສະນະເປັນວົງ Planar ຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງທີ່ມີຫົກ delocalized $pi$-ເອເລັກໂຕຣນິກ. ສອງເອເລັກໂຕຣນິກມາຈາກໄນໂຕຣເຈນທີ່ຄ້າຍຄື pyrrole. ສີ່ອັນທີ່ຍັງເຫຼືອແມ່ນມາຈາກພັນທະບັດຄູ່ໃນກອບຂອງຄາບອນ-ໄນໂຕຣເຈນ. ຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງກິ່ນຫອມນີ້ປົກປ້ອງໂມເລກຸນຈາກການເຊື່ອມໂຊມຢ່າງໄວວາໃນສະພາບແວດລ້ອມຂອງເຊນທີ່ຮຸນແຮງ.
ລັກສະນະທີ່ສໍາຄັນອີກອັນຫນຶ່ງແມ່ນ tautomerism. ວົງແຫວນສະຫຼັບກັນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງລະຫວ່າງສອງລັດທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ເຫຼົ່ານີ້ເອີ້ນວ່າ $N^epsilon$ ແລະ $N^delta$ tautomers. ຕໍາແຫນ່ງຂອງອະຕອມຂອງໄຮໂດເຈນໂດດລະຫວ່າງສອງປະລໍາມະນູໄນໂຕຣເຈນ. ການປ່ຽນແປງນີ້ບໍ່ໄດ້ເກີດຂຶ້ນແບບສຸ່ມ. ມັນຕອບສະຫນອງໂດຍກົງກັບສະພາບແວດລ້ອມຈຸນລະພາກທ້ອງຖິ່ນ, ເຊັ່ນ: ການປ່ຽນແປງຂອງ pH ຫຼືການຕົກຄ້າງຂົ້ວໂລກໃກ້ຄຽງ. ໃນເວລາທີ່ທ່ານປະເມີນສະຖານທີ່ຜູກມັດທາດໂປຼຕີນ, ທ່ານຕ້ອງບັນຊີສໍາລັບ tautomerism ນີ້. ມັນຊີ້ບອກໂດຍກົງວ່າໂມເລກຸນມີປະຕິກິລິຍາກັບທາດຍ່ອຍທີ່ຕັ້ງເປົ້າໝາຍແນວໃດ.
ປະເພດໄນໂຕຣເຈນ |
ການປະກອບສ່ວນເອເລັກໂຕຣນິກ |
ບົດບາດທາງເຄມີ |
|---|---|---|
ຄ້າຍ Pyrrole ($N1$) |
ບໍລິຈາກເອເລັກໂຕຣນິກ 2 ອັນໃຫ້ກັບລະບົບ $pi$-system |
ເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນຜູ້ໃຫ້ທຶນພັນທະບັດ hydrogen |
ຄ້າຍ pyridine ($N3$) |
ບໍລິຈາກ 0 ອິເລັກຕອນໃຫ້ກັບລະບົບ $pi$- (ຄູ່ດ່ຽວເປັນວົງໂຄ້ງ) |
ເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນຕົວຮັບພັນທະບັດ hydrogen ຫຼືພື້ນຖານທີ່ອ່ອນແອ |
ຄວາມເຂົ້າໃຈໂຄງສ້າງແມ່ນພຽງແຕ່ຂັ້ນຕອນທໍາອິດ. ທ່ານຕ້ອງແຜນທີ່ລັກສະນະເຫຼົ່ານີ້ເພື່ອຜົນໄດ້ຮັບທາງຊີວະພາບທີ່ເຫັນໄດ້ຊັດເຈນ. ໃນເຕັກໂນໂລຍີຊີວະພາບ, ພຶດຕິກໍາຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂ້າງຄຽງທີ່ຊັດເຈນກໍານົດຜົນສໍາເລັດຂອງການພັດທະນາການວິເຄາະແລະການສ້າງຢາ. ຖ້າສູດໜຶ່ງປ່ຽນ pH ທ້ອງຖິ່ນຢ່າງແຮງເກີນໄປ, ໂມເລກຸນຈະສູນເສຍຄ່າທຳງານຂອງມັນ. ຄວາມລົ້ມເຫຼວນີ້ສາມາດທໍາລາຍ batches ທັງຫມົດຂອງໂປຣຕີນການປິ່ນປົວ.
ລັກສະນະ amphoteric ຂອງຕ່ອງໂສ້ຂ້າງເຮັດໃຫ້ກິດຈະກໍາ catalytic ມີອໍານາດ. ເນື່ອງຈາກວ່າ pKa ຂອງມັນຢູ່ໃກ້ກັບ 6.0, ມັນສາມາດສະຫຼັບລະຫວ່າງລັດ protonated ແລະ deprotonated ໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍທີ່ pH physiological. ນີ້ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນ buffer ຊີວະພາບທີ່ເຫມາະສົມ. ສິ່ງທີ່ ສຳ ຄັນກວ່ານັ້ນ, ມັນເຮັດ ໜ້າ ທີ່ເປັນລະບົບສົ່ງ proton ທົ່ວໄປໃນສະຖານທີ່ທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຂອງ enzyme. ສໍາລັບຕົວຢ່າງ, ເອົາ serine proteases. ໃນ triad catalytic ທີ່ມີຊື່ສຽງ (Asp-His-Ser), histidine ເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນຕົວກາງທີ່ສໍາຄັນ. ມັນດຶງ proton ຈາກ serine, ກະຕຸ້ນມັນສໍາລັບການໂຈມຕີ nucleophilic. ໂດຍບໍ່ມີການແລກປ່ຽນ proton ແບບເຄື່ອນໄຫວນີ້, enzyme ຈະ inert ຫມົດ.
ນອກເຫນືອຈາກການປິດ proton, ລະບົບຕ່ອງໂສ້ຂ້າງແມ່ນດີເລີດໃນການປະສານງານ ion ໂລຫະ. ອະຕອມໄນໂຕຣເຈນທີ່ອຸດົມດ້ວຍເອເລັກໂຕຣນິກສາມາດຜູກມັດກັບໂລຫະການປ່ຽນແປງເຊັ່ນ: ສັງກະສີ, ທອງແດງ, ແລະທາດເຫຼັກ. ລັກສະນະນີ້ເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບການເຮັດວຽກຂອງໂລຫະໂລໂປຣຕີນ. ມັນຍັງເປັນ metric ພື້ນຖານສໍາລັບເຕັກນິກການຊໍາລະທາດໂປຼຕີນທີ່ທັນສະໄຫມ. ໃນເວລາທີ່ການອອກແບບ chromatography ໂລຫະ, ວິສະວະກອນອີງໃສ່ກົນໄກການຜູກມັດທີ່ແນ່ນອນນີ້.
ພິຈາລະນາອະນຸສັນຍາມາດຕະຖານສໍາລັບການຊໍາລະລ້າງປ້າຍຂອງລາວ. ຂະບວນການປະຕິບັດຕາມລໍາດັບເຫດການສະເພາະສູງ:
ການສະແດງອອກ: ທ່ານວິສະວະກໍາທາດໂປຼຕີນຈາກ recombinant ທີ່ມີຫາງ polyhistidine (ປົກກະຕິແລ້ວ 6 ຫາ 8 residues).
Immobilization: ທ່ານກະກຽມ resin matrix ບັນຈຸມີ immobilized ໂລຫະ divalent ion (ໂດຍປົກກະຕິ $Ni^{2+}$ ຫຼື $Co^{2+}$).
ການປະສານງານ: lysate ທາດໂປຼຕີນຈາກ recombinant ໄຫຼຜ່ານ resin. ໄດ້ ແຫວນ imidazole ປະສານສົມທົບກັບ ion ໂລຫະຢ່າງແຂງແຮງ, ຍຶດເອົາໂປຣຕີນເປົ້າໝາຍ.
Elution: ທ່ານແນະນໍາຕົວແທນການແຂ່ງຂັນ (ເຊັ່ນ: buffer ເຂັ້ມຂຸ້ນ) ເພື່ອຍ້າຍວົງແຫວນ, ປ່ອຍທາດໂປຼຕີນທີ່ບໍລິສຸດ.
ໃນຂະນະທີ່ histidine ພື້ນເມືອງເຮັດວຽກມະຫັດສະຈັນໃນຊີວະສາດ, ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກສັງເຄາະບອກເລື່ອງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ຖ້າທ່ານສັງເຄາະ peptides, ທ່ານຮູ້ວ່າອາຊິດ amino ນີ້ແນະນໍາການທ້າທາຍຕິກິຣິຍາທີ່ຮ້າຍແຮງ. ວົງແຫວນທີ່ບໍ່ໄດ້ປ້ອງກັນເຮັດໃຫ້ເກີດອາການແຊກຊ້ອນໃນທັນທີລະຫວ່າງວົງຈອນການເຊື່ອມ peptide ມາດຕະຖານ.
ອັນຕະລາຍຕົ້ນຕໍແມ່ນ racemization. ໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ peptide ໄລຍະແຂງ (SPPS), ໄນໂຕຣເຈນພື້ນຖານສາມາດທໍາຮ້າຍກຸ່ມ carboxyl activated ຂອງ residue ຂອງຕົນເອງ. ນີ້ປະກອບເປັນຕົວກາງທີ່ scrambles ສູນ chiral ໄດ້. ແທນທີ່ຈະເປັນລໍາດັບ L-histidine ອັນບໍລິສຸດ, ທ່ານໄດ້ຮັບສ່ວນປະສົມຂອງ L ແລະ D enantiomers. ນອກຈາກນັ້ນ, ໄນໂຕຣເຈນທີ່ມີປະຕິກິລິຍາສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດ acylation ຂອງຕ່ອງໂສ້ຂ້າງຄຽງທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ. ນີ້ສ້າງ peptides ທີ່ແຕກຫັກ, ຜິດປົກກະຕິທີ່ທໍາລາຍຜົນຜະລິດສຸດທ້າຍຂອງທ່ານ. ທ່ານຕ້ອງຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງເຫຼົ່ານີ້ຢ່າງຕັ້ງຫນ້າ.
ນັກເຄມີອີງໃສ່ກຸ່ມປົກປ້ອງສະເພາະເພື່ອປ້ອງກັນວົງໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ. ໃຫ້ພວກເຮົາປະເມີນສອງປະເພດການແກ້ໄຂຕົ້ນຕໍ.
ການປົກປ້ອງ Trityl ຍັງຄົງເປັນມາດຕະຖານອຸດສາຫະກໍາສໍາລັບເຄມີທີ່ອີງໃສ່ Fmoc. ກຸ່ມ triphenylmethyl ຂະຫນາດໃຫຍ່ຕິດກັບອະຕອມ $N^ au$. ຂະຫນາດ sheer ສະຫນອງການຂັດຂວາງ steric ທີ່ດີເລີດ. ສິ່ງກີດຂວາງທາງກາຍຍະພາບນີ້ປິດເສັ້ນທາງ racemization ຢ່າງມີປະສິດທິຜົນ. Trt ແມ່ນໄດ້ຮັບຄວາມນິຍົມສູງເພາະວ່າມັນແຍກອອກຢ່າງສະອາດພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເປັນກົດອ່ອນໆ (ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວໃຊ້ອາຊິດ trifluoroacetic). ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ທ່ານຕ້ອງຄວບຄຸມຢ່າງລະມັດລະວັງຂອງເຄື່ອງຂູດຂີ້ເຫຍື້ອເພື່ອປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ກຸ່ມ Trt cleaved ຕິດຕໍ່ກັບ residues ອື່ນໆ.
ຖ້າໂປໂຕຄອນຂອງທ່ານໃຊ້ Boc ເຄມີ, ທ່ານອາດຈະປະເມີນການປົກປ້ອງ Benzyloxymethyl (Bom) ຫຼື t-Butoxymethyl (Bum). ກຸ່ມເຫຼົ່ານີ້ປິດບັງອະຕອມ $N^pi$. ພວກເຂົາເຈົ້າສະຫນອງການປ້ອງກັນທີ່ເຂັ້ມແຂງຕໍ່ກັບປະຕິກິລິຍາຂ້າງຄຽງ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ພວກເຂົາເຈົ້າແນະນໍາການຈັດການຄວາມກັງວົນທີ່ສໍາຄັນ. Cleaving Bom ຕ້ອງການສະພາບທີ່ຮຸນແຮງ (ເຊັ່ນ: ໄຮໂດຣເຈນ fluoride). ຮ້າຍແຮງກວ່າເກົ່າ, ຂະບວນການແຕກແຍກສາມາດປ່ອຍ formaldehyde. ຜະລິດຕະພັນທີ່ເປັນພິດນີ້ສາມາດເຊື່ອມຕໍ່ລໍາດັບ peptide ຂອງທ່ານໄດ້ຖ້າທ່ານບໍ່ຕິດມັນທັນທີ. ທ່ານຕ້ອງຊັ່ງນໍ້າໜັກເລື່ອງຄວາມປອດໄພ ແລະ ສານພິດເຫຼົ່ານີ້ກ່ອນການຈັດຕັ້ງປະຕິບັດ.
ໃນທີ່ສຸດ, ເງື່ອນໄຂຄວາມສໍາເລັດຂອງທ່ານແມ່ນຂຶ້ນກັບຂອບເຂດໂຄງການ. ທ່ານຕ້ອງເລືອກເອົາກຸ່ມປົກປັກຮັກສາທີ່ເຫມາະສົມໂດຍອີງໃສ່ຄວາມຍາວລໍາດັບ, ສະພາບການ cleavage, ແລະຜົນຜະລິດຄວາມບໍລິສຸດທີ່ຕ້ອງການ. ການບໍ່ກົງກັນຢູ່ບ່ອນນີ້ຈະເຮັດໃຫ້ເຈົ້າເສຍເວລາ ແລະວັດຖຸດິບທີ່ມີຄ່າ.
ເມື່ອການຫັນປ່ຽນຈາກການເຮັດວຽກຂອງນັກວິຊາການໄປສູ່ການຜະລິດການຄ້າ, ການຈັດຫາແຫຼ່ງແມ່ນສໍາຄັນ. ທ່ານບໍ່ສາມາດພຽງແຕ່ສັ່ງຊື້ອະນຸພັນລາຄາຖືກທີ່ສຸດ. ທ່ານຕ້ອງປະເມີນຜູ້ສະຫນອງສານເຄມີໂດຍຜ່ານກອບການວິເຄາະທີ່ເຄັ່ງຄັດ. ທາດປະຕິສັງຂອນທີ່ມີຄຸນນະພາບບໍ່ດີແນະນຳສິ່ງສົກກະປົກທີ່ຂະຫຍາຍເປັນເຄື່ອງວັດແທກການສັງເຄາະຂອງທ່ານ.
ຂະບວນການປະເມີນຜົນຂອງທ່ານຄວນເນັ້ນໃສ່ສາມມິຕິຕົ້ນຕໍ:
ຄວາມບໍລິສຸດ & Chiral Integrity: ສະເຫມີກວດກາໃບຢັ້ງຢືນການວິເຄາະ (CoA). ເບິ່ງໂດຍສະເພາະສໍາລັບ trace enantiomeric impurities (D-histidine). ດັ່ງທີ່ໄດ້ສົນທະນາກ່ອນໜ້ານີ້, ຍຸດທະສາດການປ້ອງກັນທີ່ຜິດພາດລະຫວ່າງຂະບວນການຜະລິດຂອງຜູ້ຂາຍເຮັດໃຫ້ເກີດການຂັດຂືນນີ້. ເຖິງແມ່ນວ່າການປົນເປື້ອນ D-enantiomer 1% ສາມາດເຮັດໃຫ້ peptide ການປິ່ນປົວທີ່ບໍ່ມີການເຄື່ອນໄຫວຢ່າງສົມບູນ.
Scalability: ການຄິດໄລ່ອັດຕາສ່ວນຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕໍ່ຜົນຜະລິດຂອງທ່ານຢ່າງລະມັດລະວັງ. ການສັງເຄາະ Benchtop ໃຫ້ອະໄພຄວາມບໍ່ມີປະສິດທິພາບເລັກນ້ອຍ. ການຜະລິດ GMP ບໍ່ແມ່ນ. ອະນຸພັນທີ່ມີການປົກປ້ອງ Trt ປົກກະຕິແລ້ວມີລາຄາຖືກກວ່າ. ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ປະສິດທິພາບການເຊື່ອມໂລຫະທີ່ສູງ ແລະ ຄວາມແຕກແຍກທີ່ສະອາດຂອງພວກມັນມັກຈະເຮັດໃຫ້ຕົ້ນທຶນການຜະລິດໂດຍລວມຕໍ່າລົງ.
ການປະຕິບັດຕາມ: ອົງການຈັດຕັ້ງກົດລະບຽບຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຈໍາກັດການຕົກຄ້າງຢ່າງເຂັ້ມງວດ. ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າຜູ້ສະຫນອງຂອງທ່ານປະຕິບັດຕາມຂໍ້ຈໍາກັດຂອງໂລຫະຫນັກ. ເອົາໃຈໃສ່ເປັນພິເສດຕໍ່ສານລະລາຍທີ່ຕົກຄ້າງ. ການສັງເຄາະອະນຸພັນທີ່ມີການປ້ອງກັນມັກຈະປະກອບດ້ວຍສານລະລາຍອິນຊີທີ່ເປັນພິດ. ວັດຖຸດິບຂອງທ່ານຕ້ອງຕອບສະໜອງໄດ້ມາດຕະຖານຢາທີ່ເຂັ້ມງວດກ່ອນທີ່ຈະເຂົ້າສູ່ຂັ້ນຕອນການເຮັດວຽກຂອງ API (ສ່ວນປະກອບຢາທີ່ໃຊ້ໄດ້).
ເພື່ອປັບປຸງການຈັດຊື້ຂອງທ່ານ, ສ້າງເຫດຜົນການຄັດເລືອກສໍາລັບຜູ້ສະຫນອງສານເຄມີທີ່ມີຄຸນວຸດທິ. ຕ້ອງການຄວາມໂປ່ງໃສໃນການວິເຄາະ. ຮ້ອງຂໍຂໍ້ມູນຄວາມສອດຄ່ອງ batch-to-batch ປະຫວັດສາດ. ຮ້ອງຂໍໃຫ້ມີການສຶກສາສະຖຽນລະພາບກ່ຽວກັບກຸ່ມປົກປ້ອງຂອງພວກເຂົາ. ຜູ້ສະໜອງທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ຈະສະໜອງຂໍ້ມູນການເສື່ອມໂຊມແບບບັງຄັບທີ່ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງກຸ່ມ Trt ຫຼື Bom ຂອງເຂົາເຈົ້າຄົງທີ່ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາມາດຕະຖານ.
ການປະກົດຕົວຂອງແຫວນທີ່ເປັນເອກະລັກຫ້າສະມາຊິກກໍານົດທັງຜົນປະໂຫຍດແລະຄວາມທ້າທາຍຂອງການເຮັດວຽກກັບ histidine. ມັນໃຫ້ທາດໂປຼຕີນທີ່ມີພະລັງງານໃນການກະຕຸ້ນປະຕິກິລິຍາແລະປະສານງານໂລຫະ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ມັນບັງຄັບໃຫ້ນັກເຄມີສັງເຄາະນໍາທາງຍຸດທະສາດການປົກປ້ອງທີ່ຊັບຊ້ອນເພື່ອຮັກສາຄວາມສົມບູນຂອງໂມເລກຸນ. ຄວາມຊໍານິຊໍານານຂອງຄວາມເປັນຈິງສອງຢ່າງເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນຈໍາເປັນສໍາລັບຄວາມສໍາເລັດໃນຊີວະເຄມີ.
ໃຊ້ຕາຕະລາງການຕັດສິນໃຈທີ່ເຄັ່ງຄັດສໍາລັບໂຄງການໃນອະນາຄົດ. ສະເຫມີຈັບຄູ່ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກສະເພາະຂອງທ່ານກັບລະດັບສານເຄມີທີ່ຖືກຕ້ອງແລະຍຸດທະສາດການປ້ອງກັນ. ຖ້າທ່ານສຶກສາຫນ້າທີ່ທາດໂປຼຕີນຈາກພື້ນເມືອງ, ສຸມໃສ່ລັດ tautomeric ແລະປະຕິສໍາພັນຂອງໂລຫະ. ຖ້າທ່ານສ້າງ peptides ສັງເຄາະ, ໃຫ້ຄວາມສໍາຄັນກັບຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງ chiral ແລະໂປໂຕຄອນ cleavage ເລືອກ.
ຂັ້ນຕອນຕໍ່ໄປຂອງທ່ານແມ່ນຈະແຈ້ງ. ກວດເບິ່ງຂໍ້ມູນຈໍາເພາະຂອງ reagent ໃນປັດຈຸບັນຂອງທ່ານ. ກວດສອບໂປຣໂຕຄອນການສັງເຄາະ peptide ຂອງຫ້ອງທົດລອງຂອງທ່ານ. ຖ້າທ່ານສັງເກດເຫັນການຫຼຸດລົງຂອງຜົນຜະລິດຫຼືຄວາມບໍ່ສະອາດທີ່ບໍ່ໄດ້ອະທິບາຍ, ດາວໂຫລດລາຍການກວດສອບການປະເມີນຜົນສໍາລັບອະນຸພັນຂອງທ່ານ. ໃນເວລາວາງແຜນການຈັດຊື້ຫຼາຍ, ປຶກສາຫາລືກັບຜູ້ຊ່ຽວຊານດ້ານເຄມີດ້ານວິຊາການເພື່ອຮັບປະກັນວັດຖຸດິບຂອງທ່ານຕອບສະຫນອງຂໍ້ຈໍາກັດທີ່ເຂັ້ມງວດ.
A: ມັນເປັນ amphoteric. ພາຍໃຕ້ສະພາບການທາງດ້ານຮ່າງກາຍ, ມັນເຮັດຫນ້າທີ່ເປັນທັງຖານອ່ອນແອແລະອາຊິດອ່ອນແອ (pKa ~ 6.0). ມັນສາມາດຍອມຮັບຫຼືບໍລິຈາກ protons seamlessly. ຄວາມສາມາດຄູ່ທີ່ເປັນເອກະລັກນີ້ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນ buffer ຊີວະພາບທີ່ເຫມາະສົມແລະເປັນອົງປະກອບທີ່ສໍາຄັນໃນ enzymes active sites.
A: ຄວາມສັບສົນມັກຈະມາຈາກລັດ protonation. ແຫວນ heterocyclic ທີ່ເປັນກາງແມ່ນມີກິ່ນຫອມແທ້ໆ, ປະຕິບັດຕາມກົດລະບຽບຂອງHückel (4n+2 $pi$-electrons). ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເນື່ອງຈາກວ່າໄນໂຕຣເຈນພື້ນຖານຂອງມັນຍອມຮັບ protons ໄດ້, ແບບຈໍາລອງແບບຮຽນແບບງ່າຍດາຍບາງຄັ້ງກໍ່ຍາກທີ່ຈະຈັດປະເພດມັນຢ່າງຊັດເຈນ, ນໍາໄປສູ່ການໂຕ້ວາທີທາງວິຊາການ.
A: ອະຕອມຂອງໄນໂຕຣເຈນທີ່ອຸດົມດ້ວຍເອເລັກໂຕຣນິກຢູ່ໃນວົງແຫວນຂອງລໍາດັບ polyhistidine ປະສານງານຢ່າງແຂງແຮງກັບ ion metal transition immobilized (ເຊັ່ນ: $Ni^{2+}$ ຫຼື $Co^{2+}$). ປະຕິສໍາພັນທີ່ເຂັ້ມແຂງນີ້ອະນຸຍາດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າປະຕິບັດການແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ສະເພາະ, ຂະຫຍາຍໄດ້, ແລະປະສິດທິພາບຈາກ lysates ຊີວະສາດສະລັບສັບຊ້ອນ.
